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第一部分 微生物发酵工程理论知识与技术策略一、微生物发酵工程的共性问题3

（一）菌种选育和优化技术3

（二）培养基的设计及其改良4

（三）发酵过程的优化与生物反应器4

（四）发酵行业清洁生产和废弃物资源化6

二、微生物发酵工程技术方法6

（一）代谢产物的过量生产7

（二）提高初级代谢产物产量的方法10

（三）提高次级代谢产物产量的方法11

三、微生物发酵工程下游分离纯化技术策略12

（一）微生物发酵产品的特点12

（二）分离纯化技术需满足的要求12

（三）下游工艺的技术特点13

（四）分离纯化方法应遵循的准则18

第二部分 微生物发酵工程综合实验内容综合实验一 生物降解材料聚羟基脂肪酸酯的微生物发酵合成21

实验1-1 PHA合成细菌的分离与纯化26

实验1-2 利用计算机微生物分类鉴定系统进行微生物的分类鉴定31

实验1-3 微生物发酵法制备生物降解材料聚羟基脂肪酸酯（摇瓶）36

实验1-4 发酵设备的工作原理及其使用方法40

实验1-5 微生物发酵法制备生物降解材料聚羟基脂肪酸酯（发酵罐）47

实验1-6 发酵液中溶解氧和基质葡萄糖含量的测定50

实验1-7 发酵液的膜过滤和菌体的冷冻干燥55

实验1-8 PHA的溶剂抽提和抽提液的浓缩60

实验1-9 PHA样品沉淀、减压干燥、核磁共振检测样品管的准备64

综合实验二 燃料油的微生物脱硫68

实验2-1 燃料油微生物脱硫菌种的制备75

实验2-2 红平红球菌对硫源的选择性78

实验2-3 DBT微生物脱硫产物的定量分析83

实验2-4 30L自控发酵罐分批发酵法脱除DBT中的有机硫85

实验2-5 发酵液中DBT含量的测定89

实验2-6 DBT脱硫产物在油／水两相中的分配系数测定92

实验2-7 利用休止细胞脱除模拟燃油中的有机硫95

综合实验三 谷氨酸的微生物发酵97

实验3-1 谷氨酸摇瓶发酵103

实验3-2 发酵过程中还原糖的测定105

实验3-3 发酵过程中谷氨酸含量的测定108

实验3-4 谷氨酸发酵生产菌种的制备112

实验3-5 30L自控发酵罐分批发酵法生产谷氨酸115

实验3-6 谷氨酸发酵液超滤除菌体与离子交换回收119

实验3-7 谷氨酸含量及纯度的HPLC分析方法122

综合实验四 黄原胶的微生物发酵125

实验4-1 野油菜黄单胞菌NK-01菌株摇瓶发酵黄原胶133

实验4-2 黄原胶高产菌株育种研究之一——紫外线诱变育种135

实验4-3 黄原胶高产菌株育种研究之二——高淀粉酶活性、杆菌肽高抗性菌株筛选138

实验4-4 优化突变菌株的发酵培养基（单因素实验和正交实验）142

实验4-5 10L自控发酵罐分批发酵生产黄原胶148

实验4-6 从发酵液中分离提取工业级黄原胶152

实验4-7 黄原胶溶液性能测定154

综合实验五 苏云金芽孢杆菌微生物杀虫剂的发酵制造157

实验5-1 苏云金芽孢杆菌菌株、伴孢晶体和芽孢的形态观察158

实验5-2 苏云金芽孢杆菌菌株分离及纯化160

实验5-3 苏云金芽孢杆菌Total DNA的提取、纯度测定和定量分析163

实验5-4 PCR检测杀虫基因166

实验5-5 苏云金芽孢杆菌10L自控罐发酵171

实验5-6 苏云金芽孢杆菌毒力的生物测定175

实验5-7 SDS-PAGE检测杀虫蛋白含量178

参考文献181